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丹麦Lightnovo高分辨率拉曼光谱仪(RGs)三类样品实测展示

更新时间:2026-06-22点击次数:35

强荧光样品也能测:丹麦Lightnovo高分辨率拉曼光谱仪(RGs)三类样品实测展示

Taikun



         在拉曼光谱测试中,荧光背景一直是影响实际应用的重要因素。许多真实样品并不是理想的纯净粉末或标准品,而是带有复杂基质、杂质、色素或生物成分的实际样品。此类样品在532nm激发条件下往往容易产生强荧光背景,导致拉曼峰被抬高的背景淹没,甚至出现“看不到有效峰"的情况。

       针对这类强荧光样品,行业中常见的解决思路包括更换近红外激发波长、降低荧光激发效率,或采用时间门控拉曼系统区分瞬时拉曼信号与寿命较长的荧光信号。时间门控系统虽然有效,但设备复杂度和采购成本通常较高。

本次使用Lightnovo高分辨率拉曼光谱仪(以下简称RGs),在785nm激发条件下,对尿结石、人脑胶质瘤切片和指甲三类强荧光倾向样品进行了实测。三组结果覆盖固体结晶样品、复杂组织切片和角蛋白类生物样品,直观展示RGs在强背景样品中的谱峰获取、差异识别和图谱呈现能力。

RGs能够在这类样品上获得有效图谱,核心来自几方面的组合:785nm近红外激发降低了可见光激发下的荧光干扰;高通量透射式衍射光学设计提升了样品到探测器的光收集效率;高灵敏度和高信噪比配置弥补了长波长激发下拉曼散射效率下降的问题;同时,激光功率、曝光时间、传感器增益和重复次数均可调,便于针对不同强荧光样品优化采集条件。

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一、尿结石样品:强背景样品中仍可分辨组分指纹峰

尿结石样品来源复杂,实际样品中常伴随有机基质、杂质和不同结晶组分。对于传统532nm拉曼系统,这类样品容易出现较强背景,影响特征峰识别。RGs在785 nm条件下能够降低荧光干扰,使不同组分的拉曼指纹峰更清晰地呈现出来。

本次测试的尿结石样品包含无水尿酸、L-胱氨酸、一水草酸钙、磷酸铵镁类物质等。不同组分具有不同的分子结构,因此在拉曼光谱中表现出差异化的特征峰位置和谱形。

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图中五类尿结石样品经归一化和纵向错位显示,便于比较不同组分的主要峰位。可以看到:

  • 无水尿酸样品在多个位置呈现清晰特征峰,谱峰数量较多,指纹区信息丰富。

  • L-胱氨酸样品具有突出的强峰响应,峰形尖锐,辨识度高。

  • 六水合磷酸铵镁和一水草酸钙样品呈现不同的主峰位置,便于进行组分区分。

  • 不同样品之间的谱形差异明显,适合用于展示拉曼光谱在固体样品成分识别中的优势。

这组结果体现了 RGs 对强背景固体样品和结晶类样品的良好适应性。样品主峰清楚、组分差异直观,能够在无需复杂时间门控系统的情况下获得可用于展示和比较的拉曼结果。

二、人脑胶质瘤切片:复杂组织强荧光背景下的有效响应

生物组织切片是典型的复杂强背景样品。与纯化合物或结晶样品相比,组织样品中蛋白质、脂质、核酸和其他生物分子共同贡献光谱信号,同时还容易产生荧光背景。对于 532nm激发系统,组织切片常常会出现背景强、峰形弱、有效信息难以提取的问题。

本次对不同编号的人脑胶质瘤切片样品进行了拉曼测试,并按病理分级信息进行标注展示。RGs在785nm激发条件下获得了可分辨的组织拉曼响应。

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图中可以看到,三条组织切片光谱均获得了可分辨的拉曼响应。不同样品之间在800-1500 cm^-1 区间表现出不同的峰形和强度分布,其中29号样品的峰位信息更为丰富。

对于组织切片类复杂样品,RGs的价值不只在于获得单个强峰,更在于能够在荧光背景存在的情况下稳定呈现整体谱形差异,为后续的样品比较、特征提取和模型分析提供基础数据。

图中的CNS WHO分级信息来自样品病理背景标注,拉曼光谱图用于展示不同病理背景样品的光谱响应差异,不等同于直接给出医学诊断结论。

三、指甲样品:角蛋白类样品的稳定拉曼响应

指甲主要由角蛋白等生物大分子组成,是一种典型的角质化生物样品。角蛋白类样品在可见光激发下同样容易出现较强背景,尤其在 532 nm 条件下,荧光背景可能影响拉曼峰观察。

本次对同一类指甲样品在不同激光功率条件下进行了测试,对比 200 mW、300 mW 和 400 mW 条件下的拉曼响应。

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从图谱可以看出,三种功率条件下均获得了完整的指甲样品拉曼响应。随着测试功率变化,整体信号强度和部分峰形细节有所差异,但主要谱形结构保持一致。

这组结果展示了RGs在日常生物样品和角蛋白类样品上的测试能力。对于需要快速获取样品拉曼响应、比较测试条件或筛选采集参数的应用场景,RGs能够在强背景样品中提供清晰直观的光谱结果。

四、从三类强荧光样品看 RGs 的产品特点

通过尿结石、胶质瘤切片和指甲三类样品的实测结果,可以看到RGs在不同应用场景下的几个突出特点:

1. 面向强荧光样品的实用测试能力

尿结石、胶质瘤切片和指甲样品都具有较强背景或荧光干扰倾向。RGs采用785nm激发方案,在实际样品中降低荧光干扰,使拉曼峰能够从复杂背景中呈现出来。

相较于532nm激发,785nm激发通常能降低许多有机、生物和复杂基质样品的荧光背景。公开拉曼应用资料也指出,785nm或830nm常用于减少荧光干扰,并在多数中等荧光样品中获得可观察的拉曼峰。对于非常强荧光样品,1064nm或时间门控等方案仍有价值;但在便携、常规测试和应用展示场景中,785nm RGs提供了性能、效率和易用性之间的平衡。

2. 谱峰分辨度高,适合做指纹峰比较

尿结石样品中,不同组分的主峰位置差异清楚,拉曼指纹峰具有较好的辨识度。对于成分差异明显的固体样品,RGs能够快速呈现样品间的谱形差别。

3. 高通量光路与高灵敏度配置提升弱信号获取能力

RG拉曼光谱仪采用高通量透射式衍射光学,样品到探测器的效率可达85%。RG Raman785型号覆盖 70-2500cm^-1 光谱范围,分辨率配置为 3/4/5 cm^-1;Power版本在聚苯乙烯测试条件下给出最高 3000:1 的峰信噪比指标。对于785nm激发下相对较弱的拉曼散射信号,这类光路效率和探测灵敏度是获得可用谱图的重要基础。

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4. 对复杂生物样品具备有效信号获取能力

胶质瘤切片和指甲样品的背景更复杂,但图谱仍能呈现出连续、可分辨的响应特征。这说明 RGs 不仅适合高信号样品,也能够用于组织切片、角质样品等复杂生物样品的光谱采集和对比展示。

5. 参数控制与软件预处理提升实际测试效率

RGs可通过PC或Android端软件进行控制,支持激光功率、曝光时间、传感器增益、重复次数和光谱范围设置。Miraspec软件还提供尖峰校正、光谱平滑、基线校正、归一化、材料识别、定量分析和分类等功能。对于强荧光背景样品,合理设置采集参数并进行适度预处理,可以更清楚地呈现峰位差异和谱形特征。

6. 相比复杂时间门控方案,更适合常规应用展示

对于强荧光样品,时间门控拉曼是一种有效但复杂的技术路线。RGs通过785 nm激发和便捷的图谱采集方式,在许多实际样品场景中能够直接获得可解释、可展示的拉曼结果,更适合常规检测、应用演示和客户现场沟通。

结语

拉曼光谱的优势在于能够以分子振动信息反映样品组成和结构差异,但强荧光背景常常限制传统拉曼系统在真实样品中的应用。Lightnovo RGs拉曼光谱仪在本次三类强荧光倾向样品测试中,分别展示了对固体结石样品、复杂组织切片样品和角蛋白类样品的光谱获取能力。

从清晰的尿结石指纹峰,到复杂组织切片的可分辨响应,再到不同功率条件下指甲样品的稳定谱形,RGs展现出良好的抗荧光干扰能力、样品适应性和应用展示价值。

面向科研测试、样品筛查、成分分析和技术演示场景,RGs可为用户提供直观、可靠、易于比较的拉曼光谱数据。

北京泰坤工业设备有限公司作为丹麦Lightnovo在中国区的总代理,全面负责RGs系列高分辨率便携式拉曼光谱仪在国内的技术咨询、销售与售后支持。该公司在仪器仪表领域拥有近二十年的行业经验,与多家欧美企业保持着长期合作关系。无论是二维材料表征、药物晶型分析,还是原位反应监测等场景,用户均可通过北京泰坤获取从方案设计到设备交付的全流程服务。



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